

2×Taq Master Mix
目录号:A001
产品包装:1ml × 1支
保存温度:-20℃
产品简介:
本制品是由Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物,并经优化配比后制得。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点,可最大限度地减少人为误差。本制品提供普通型/快速上样型(含蓝色染料)两种形式供您选择。经测试,高纯度染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
产品特点:
高效:扩增长度可达8kb,能高效扩增≤4kb的片段。
灵敏:可从低至0.05ng的人基因组模板中扩增出特定基因片段。
稳定:反复冻融数十次,于4℃放置30天,或室温放置一周,活性均无明显改变。
快捷:集PCR反应所需各种试剂于一管,可快速完成体系配制。
便利:快速上样型在PCR反应完成后可直接电泳。
产品用途:
1、常规PCR克隆及鉴定
2、需较高灵敏度的PCR扩增
3、平末端PCR产物加”A”
使用建议:
使用本制品扩增得到的PCR产物3’端具有”A”突出,可直接克隆至T-Vector中;
PCR反应液最好在冰上配制,然后置于PCR仪中运行PCR反应;
本制品灵敏度高,建议常规PCR反应的循环数不超过32个。
反应体系(50μL):
2×Taq Master Mix |
25μL |
上游引物 |
0.2-1.0μM(终浓度) |
下游引物 |
0.2-1.0μM(终浓度) |
模板 |
1-50ng质粒或10ng-1μg基因组 |
ddH2O |
补足至50μL |
注:一般推荐反应体系为20-50μL,其中Mg2+终浓度为2mM。
反应条件:
1、当扩增片段<3kb时,建议反应条件为:
94℃ |
90sec |
|
94℃ |
30sec |
30个循环 |
57℃ |
30sec | |
72℃ |
1min/1kb | |
72℃ |
5min |
|
4℃ |
∞ |
2、当扩增片段≥3kb时(推荐引物长度≥30bp),建议反应条件为:
94℃ |
20sec |
|
94℃ |
5sec |
30个循环 |
68℃ |
1min/1kb | |
72℃ |
5min |
|
4℃ |
∞ |
注:以上反应条件参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而异,需根据实际情况确定最佳反应条件。
应用实例:
在50μL反应体系中,使用2×Taq Master Mix以不同浓度(0.05-50ng)的小鼠基因组DNA为模板对某特定基因(1.1kb)进行扩增,结果如下:
说明书下载链接http://www.tagene.net/uploadfile/201405/20140521105626943.pdf